Грампозитивті және грамтеріс бактерияларды анықтау

Мектеп жағдайына арналған қауіпсіз микроорганизмдер:

КөзҚұрамындағы микроорганизмдерЕрекшелігі
Йогурт және қышқыл сүт өнімдеріLactobacillus (грампозитивті таяқшалар)Жағынды жасап, бояуға болады
Нан зеңі / ашытқы (Saccharomyces cerevisiae)Эукариоттар, бірақ Gram әдісінде салыстыру үшін қолданыладыҚауіпсіз және көрнекі
Пробиотикалық капсулаларКөбіне грампозитивті, қауіпсіз бактерияларДәріханада немесе денсаулық дүкендерінде сатылады
Тірі мәдениеті бар айран, кефирStreptococcus thermophilus — грампозитивті кокктарМикроскопта бақылауға ыңғайлы
Көкөніс/жеміс қабығының бетіӘдетте грамтеріс таяқшаларҚияр, алма секілді табиғи үлгілерден алуға болады
Топырақ (өңделмеген)Түрлі грампозитивті және грамтеріс бактерияларТүрлі пішін мен бояуды көрсетуге болады
Пробиотикалық ашытқылар / кефир саңырауқұлақтарыҚауіпсіз және микроскопта айқын көрінеді

1-қадам. Жағындыны дайындау

  • Таза заттық әйнекке дистилденген судың бір тамшысын тамызыңыз.
  • Асептикалық тәсілмен (таза құралмен) аз мөлшерде бактерия алыңыз немесе дайын оқу препараты қолданыңыз.
  • Үлгіні әйнек бетіне жұқа қабат етіп жағыңыз (тым қалың болмауы керек).
  • Жағындыны ауада құрғатыңыз, кейін оны бекітіңіз (жеңіл қыздыру арқылы немесе нұсқаулыққа сай).

2-қадам. Бояу кезеңдері

  • Кристаллды күлгін ерітіндісін жағыңыз, 1 минут күтіңіз, содан соң сумен шайыңыз.
  • Люголь ерітіндісін (йод) қосыңыз, 1 минуттан кейін шайыңыз.
  • 95% этанолмен түссіздендіріңіз — шамамен 20 секунд (көп ұстамаңыз), кейін шайыңыз.
  • Сафраниндпен қарсы бояу жасаңыз, 1 минут күтіңіз.
  • Сумен шайып, сүзгі қағазымен ақырын құрғатыңыз.

3-қадам. Микроскоп арқылы бақылау

  • Препаратты микроскоптың үстеліне қойып, алдымен аз үлкейту арқылы қараңыз.
  • Кейін жоғары үлкейтуге (иммерсия немесе 100× объектив) ауысыңыз.

Клеткалардың түсіне назар аударыңыз:

Күлгін түсті — грампозитивті бактериялар

Қызғылт/қызыл түсті — грамтеріс бактериялар

Көргеніңізді дәптерге салыңыз (немесе фото түсіріңіз), бактерия пішіндерін және түстерін белгілеңіз.

Нәтижелерді тіркеу кестесі

№Бояу кезеңіКлетка түсіБактерия түріБақылау нәтижесі
1Кристаллды күлгін
2Йод (Люголь ерітіндісі)
3Спиртпен түссіздендіру
4Сафранин

Талдау және қорытынды

Нәтижелерді бактериялардың жасуша қабырғасының құрылысына байланысты түсіндіріңіз:

  • Грампозитивті — қалың пептидогликан қабаты.
  • Грамтеріс — қабаты жұқа және сыртқы мембранасы бар.

Төмендегі сұрақтарға жауап беріңіз:

  • Екі топты анық ажырату мүмкін болды ма?
  • Қандай қателер орын алуы мүмкін (мысалы, жағынды тым қалың, спиртпен артық өңдеу)?
  • Келесі жолы бояудың сапасын қалай жақсартуға болады?
  • Иммерсиялық объективі бар микроскоп (немесе жоғары үлкейту объективі, егер иммерсия болмаса)
  • Таза заттық және жабын әйнектер
  • Грам әдісіне арналған бояу жиынтығы: кристаллды күлгін, Люголь ерітіндісі (йод), 95% спирт/этанол, сафранин
  • Дистилденген суы бар бүріккіш
  • Сүзгі қағазы
  • Бір рет қолданылатын қолғаптар
  • Әйнек ұстауға арналған қысқыш немесе қысқыш тіреуіш
  • Қауіпсіз бактериялық дақыл (оқу мақсатындағы, патогенді емес) немесе алдын ала дайындалған жағынды
  • Маркер және жазба дәптері