Грампозитивті және грамтеріс бактерияларды анықтау

Мектеп жағдайына арналған қауіпсіз микроорганизмдер:

КөзҚұрамындағы микроорганизмдерЕрекшелігі
Йогурт және қышқыл сүт өнімдеріLactobacillus (грампозитивті таяқшалар)Жағынды жасап, бояуға болады
Нан зеңі / ашытқы (Saccharomyces cerevisiae)Эукариоттар, бірақ Gram әдісінде салыстыру үшін қолданыладыҚауіпсіз және көрнекі
Пробиотикалық капсулаларКөбіне грампозитивті, қауіпсіз бактерияларДәріханада немесе денсаулық дүкендерінде сатылады
Тірі мәдениеті бар айран, кефирStreptococcus thermophilus — грампозитивті кокктарМикроскопта бақылауға ыңғайлы
Көкөніс/жеміс қабығының бетіӘдетте грамтеріс таяқшаларҚияр, алма секілді табиғи үлгілерден алуға болады
Топырақ (өңделмеген)Түрлі грампозитивті және грамтеріс бактерияларТүрлі пішін мен бояуды көрсетуге болады
Пробиотикалық ашытқылар / кефир саңырауқұлақтарыҚауіпсіз және микроскопта айқын көрінеді

1-қадам. Жағындыны дайындау

  • Таза заттық әйнекке дистилденген судың бір тамшысын тамызыңыз.
  • Асептикалық тәсілмен (таза құралмен) аз мөлшерде бактерия алыңыз немесе дайын оқу препараты қолданыңыз.
  • Үлгіні әйнек бетіне жұқа қабат етіп жағыңыз (тым қалың болмауы керек).
  • Жағындыны ауада құрғатыңыз, кейін оны бекітіңіз (жеңіл қыздыру арқылы немесе нұсқаулыққа сай).

2-қадам. Бояу кезеңдері

  • Кристаллды күлгін ерітіндісін жағыңыз, 1 минут күтіңіз, содан соң сумен шайыңыз.
  • Люголь ерітіндісін (йод) қосыңыз, 1 минуттан кейін шайыңыз.
  • 95% этанолмен түссіздендіріңіз — шамамен 20 секунд (көп ұстамаңыз), кейін шайыңыз.
  • Сафраниндпен қарсы бояу жасаңыз, 1 минут күтіңіз.
  • Сумен шайып, сүзгі қағазымен ақырын құрғатыңыз.

3-қадам. Микроскоп арқылы бақылау

  • Препаратты микроскоптың үстеліне қойып, алдымен аз үлкейту арқылы қараңыз.
  • Кейін жоғары үлкейтуге (иммерсия немесе 100× объектив) ауысыңыз.

Клеткалардың түсіне назар аударыңыз:

Күлгін түсті — грампозитивті бактериялар

Қызғылт/қызыл түсті — грамтеріс бактериялар

Көргеніңізді дәптерге салыңыз (немесе фото түсіріңіз), бактерия пішіндерін және түстерін белгілеңіз.

Нәтижелерді тіркеу кестесі

Бояу кезеңіКлетка түсіБактерия түріБақылау нәтижесі
1Кристаллды күлгін
2Йод (Люголь ерітіндісі)
3Спиртпен түссіздендіру
4Сафранин

Талдау және қорытынды

Нәтижелерді бактериялардың жасуша қабырғасының құрылысына байланысты түсіндіріңіз:

  • Грампозитивті — қалың пептидогликан қабаты.
  • Грамтеріс — қабаты жұқа және сыртқы мембранасы бар.

Төмендегі сұрақтарға жауап беріңіз:

  • Екі топты анық ажырату мүмкін болды ма?
  • Қандай қателер орын алуы мүмкін (мысалы, жағынды тым қалың, спиртпен артық өңдеу)?
  • Келесі жолы бояудың сапасын қалай жақсартуға болады?
  • Иммерсиялық объективі бар микроскоп (немесе жоғары үлкейту объективі, егер иммерсия болмаса)
  • Таза заттық және жабын әйнектер
  • Грам әдісіне арналған бояу жиынтығы: кристаллды күлгін, Люголь ерітіндісі (йод), 95% спирт/этанол, сафранин
  • Дистилденген суы бар бүріккіш
  • Сүзгі қағазы
  • Бір рет қолданылатын қолғаптар
  • Әйнек ұстауға арналған қысқыш немесе қысқыш тіреуіш
  • Қауіпсіз бактериялық дақыл (оқу мақсатындағы, патогенді емес) немесе алдын ала дайындалған жағынды
  • Маркер және жазба дәптері